Почти одновременно вышла из печати работа В. Я. Данилевского, посвященная преимущественно трипанозомам. В ней он дает гораздо более подробное, чем у его предшественников, описание этих биченосцев, которых он наблюдал у бесхвостых земноводных: древесницы, болотной и зеленой лягушек. Исследованные трипанозомы встречаются в четырех формах: простейшая — мембранозная, пластинчатая — свернутая, спиральная и, наконец, гребенчатая спирально закрученная. С помощью капиллярных культур впервые удалось проследить размножение этих простейших. Тело гребенчато-закрученной формы постепенно округляется, ундулирующая мембрана и жгутик исчезают. Вскоре ядро разделяется на две половины, а за ним и вся протоплазма. Такое деление повторяется несколько раз. Автору удалось наблюдать образование 64 и больше мелких шарообразных потомков из одного одноклеточного индивидуума. Вслед за прекращением деления начинается удлинение тела, образуется жгутик. Позже появляется мембрана.
В этой же работе также подробно были описаны трй-панозомы крови костистых рыб: карпа, линя, вьюна, гольца, окуня и др. Их строение более примитивно, чем строение трипанозом земноводных. Оно представлено двумя основными формами: простой, не имеющей мембраны и видимого ядра, но обладающей жгутиком, и более совершенной веретеновидной с узкой ундулирующей мембраной и ясно видимым ядром. У этих трипанозом не удалось наблюдать многократного деления, отмеченного у родственных им форм в крови лягушек. Здесь перед делением происходит лишь незначительное упрощение формы без потери жгутика. Очень интересно, что после деления «более молодой потомок выглядит как простая монада, тогда как другой более старый Haematozoon сохраняет все биологические свойства исходной формы» (1885, 2, стр. 534). В этой же статье имеется упоминание о трипанозомах, обнаруженных автором в крови птиц, которых он обозначил как Trypanosoma avium.
Большое место уделено вопросу о трипанозомах птиц в монографии В. Я. Данилевского, опубликованной в 1888 г. По его мнению, заслуживает серьезного внимания тот важный факт, что у земноводных и рыб трипанозомы обнаруживаются преимущественно в почках, а у птиц — в костном мозгу. «Этот орган, — считает он, — важен не только как место скопления для Haematozoa, но так же как место их развития и размножения» (1888, 1, стр. 98—99). В примечании В. Я. Данилевский высказал очень важную мысль о том, что костный мозг и у человека может быть местом размножения как гематозоев, так и других паразитов, как, например, спирохет возвратного тифа.
Сравнивая трипанозом птиц, рыб, земноводных, а также подробно описанную им и А. П. Шалашниковым трипа-нозому грызунов, которую они именовали Herpetomonas Lewisi, В. Я. Данилевский обращает внимание на отсутствие у этих одноклеточных инцистирования, характерного для жгутиковых, обитающих в органах пищеварения или живущих свободно. Эта особенность биченосцев, паразитирующих в крови, является следствием того влияния на их физиологические свойства, которое оказывают своеобразные условия окружающей среды. В рассматриваемой работе подчеркивается также большая изменчивость паразитических жгутиковых, связанная с разными этапами их развития, и отмечается сходство между ранними стадиями онтогенеза трипанозом и более примитивными формами. «Таким образом,—пишет Василий Яковлевич,— близкие отношения Trypanosoma к простым монадам (Сег-comonas, Bodo) всего лучше выясняются на ее молодых стадиях, которые оставались до сих пор неизвестными. Весьма возможно, повторяю, что их принимали за самостоятельные формы из упомянутых genera вследствие незнания связи между Trypanomonas и Trypanosoma» (1888, 1, стр. 120). Эти постепенные переходы от примитивных форм к более сложным В. Я. Данилевский иллюстрирует собственными рисунками.
Что касается систематических различий, то, согласно В. Я. Данилевскому, они связаны с высотой организации и биологическими особенностями самих хозяев, определяющими условия существования их паразитов. С этой точки зрения он намечает шесть этапов усложнения трипанозом от простейшей пластинчатой формы у рыб и земноводных и до Herpetomonas, обитающих у млекопитающих. Надо признать, что и в настоящее время вопрос о виде у трипанозом представляет чрезвычайные трудности, являющиеся следствием именно тех обстоятельств, на которые давно указал В. Я. Данилевский. В вышедшей в 1951 г. книге крупнейший советский протистолог В. А, Догель отмечает, что к 1933 г. было описано более 400 видов одного лишь рода Trypanosoma из крови позвоночных, принадлежащих к различным классам. Однако более 90% их являются лишь синонимами. Такое положение вещей есть результат невозможности классифицировать трипанозомы на основании морфологических признаков, считающихся обычно достаточно надежными. Как и В. Я. Данилевский, он предлагает использовать для этой цели всю совокупность пригодных для диагностики признаков, в том числе жизненные циклы, в большинстве случаев еще мало изученные.
Само размножение этих организмов определяется условиями окружающей среды. В. Я. Данилевскому никогда не удавалось наблюдать его в свежей крови, взятой из периферических сосудов и сердца. Зато множество делящихся и юных форм можно наблюдать в такой крови через несколько часов после ее извлечения. В. Я. Данилевскому удавалось экспериментально стимулировать размножение триианозом в организме путем остановки кровообращения, которую он вызывал перевязкой крупных сосудов. Отсюда вытекает заключение, что «из всех условий нормального состояния крови в сосудах движению ее следует приписать помеху или противодействие для процесса размножения» (Данилевский, 1888, 1, стр. 124). А. П. Шалашников не только участвовал в исследованиях своего руководителя. Он дополнил результаты совместной с ним работы собственными наблюдениями, в частности теми, которые он произвел в 1885,1886 и 1887 гг. во время поездок для борьбы с эпизоотиями в окрестностях Тобольска и Херсона. Он показал, что трипанозомы рыб встречаются особенно часто у карася, щуки, карпа и ерша. Им было обнаружено широкое распространение Herpetomonus (Trypanosoma) Lewisi не только у крыс и хомяков, но и у сусликов. Ему удалось культивировать этих простейших в сыворотке крови собаки. При этом наблюдалось размножение путем продольного деления и «сегментация» с образованием массы мелких веретеновидных телец.
Подводя итоги работам В. Я. Данилевского и А. П. Шалашникова по исследованию распространения, экологии, размножения и развития, изменчивости и систематики паразитических жгутиковых, можно с полным основанием сказать, что они собрали важнейший материал, дающий биологическую характеристику установленного в 1901 г. Дофлейном (Doflein) семейства Trypanosomidae. Трипанозома, найденная русскими учеными в окрестностях Харькова у карпа, была позже обнаружена Лавераном и Менилем (A. Laveran, Mesnil) во Франции и названа ими в честь харьковского физиолога и протистолога Trypanosoma Danilewskyi (1904).
При всей важности исследований В. Я. Данилевского и А. П. Шалашникова, посвященных одноклеточным животным, обитающим в плазме крови, еще большее значение в истории науки имели их труды, касающиеся внутриклеточных паразитов крови.
В 1880 г. И. Гауле, руководивший занятиями В. Я. Данилевского по гистологии в лаборатории К. Людвига, выступил с сообщением об открытых им «червячках» в эритроцитах лягушки. Он констатировал, что эти «червячки» растут за счет протоплазмы красных кровяных телец, активно движутся и впоследствии покидают место своего происхождения. После этого, по его данным, в конце концов погибают как «червячки», так и покинутые ими эритроциты. Подчеркивая, что слово «червячок» совсем не говорит о принадлежности этих образований к зоологической группе червей, Гауле вообще отрицал их животную индивидуальность. По его мнению, они являются лишь продуктами дегенеративных изменений красных кровяных телец. Доказательства правильности этого убеждения он черпал из следующих данных: 1) «червячки» не преформированы в крови; 2) их развитие зависит от условий, которые можно экспериментально изменять; 3) они растворяются в жидкости, в которой их наблюдают; 4) они встречаются в крови самых сильных лягушек — если бы они были паразитами, то должны были бы ослаблять своих хозяев. В следующем году он уточнил свои данные: «Многое из того, что я сообщил в предыдущей статье, должно было указывать, что следует искать связь между цитозоями и ядрами. Но все же я был в высшей степени поражен, когда однажды круглое ядерное образование, образование, которое я с полным правом считал свободным ядром, на моих глазах вывернулось, вытянулось, после нескольких колебаний заострилось на одном конце и как Cytozoon уползло. Наблюдение можно было сотни раз повторять, и я всегда видел, как все неподвижные формы червячков, в том виде, как они изображены на рисунках, берут свое начало от свободных ядер».
В 1882 г. английский зоолог Э. Рэй Ланкестер (Е. Ray Lankester) также обнаружил «червячков», развивающихся в красных кровяных тельцах лягушки. Однако он решительно настаивал на том, что эти «червячки» не являются продуктами дегенерации эритроцитов. Он считал их одноклеточными животными и дал им родовое название Drepanidium. Однако Рэй Ланкестеру не удалось достаточно полно проследить развитие этих существ и обосновать таким образом свою точку зрения.
